BioReady 熱不安定性UDG

Name: BioReady 熱不安定性UDG
Brand: Bioer Technology

BioReady 熱感受性ウラシル-DNA グリコシラーゼ（UDG）は、大腸菌における組換えクローニングと発現から得られます。6 塩基対より長い一本鎖または二本鎖 DNA 中のウラシル（U）を効果的に加水分解し、RNA には活性を示しません。主な用途は、PCR 増幅産物のコンタミネーション防止です。本酵素は、PCR 反応において dTTP を dUTP に置き換えることで、dU 塩基を含む PCR 増幅産物を生成します。その後、UDG がこれらの増幅産物中の dU 塩基を切断し、脱塩基部位を生じさせることで、DNA 鎖がその後の PCR の鋳型として機能するのを防ぎ、PCR 産物のコンタミネーション防止を達成します。さらに、この熱感受性 UDG は、後続の 50°C 逆転写または 95°C プレ変性ステップで失活し、鋳型の増幅に影響を与えません。

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製品説明

BioReady Heat-labile UDG（ウラシル-DNA グリコシラーゼ）は、6 bp 以上の dU を含む一本鎖または二本鎖 DNA からウラシルを遊離させます。一方、RNA や通常の dT を含む DNA には作用しません。UDG は、PCR で dTTP の代わりに dUTP が取り込まれた dU 含有 PCR 産物からウラシルを除去します。その結果生じた脱塩基部位は、PCR による複製を阻害します。主に PCR 増幅産物のキャリーオーバーコンタミネーション防止に用いられます。本酵素は熱感受性で、50°C 以上で 10 分間処理することにより完全かつ不可逆的に失活します。

製品特長

熱感受性：50°C、10 分間の加熱で失活します。

広範な適用性：ワンステップ RT-PCR 系と互換性があります。

応用分野

ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）

部位特異的変異導入

クローニング

シーケンシング

ジェノタイピング

遺伝子発現解析

応用事例

BioReady 熱感受性ウラシル-DNA グリコシラーゼ（BSA51）を含む場合と含まない場合のワンステップ RT-qPCR 試薬を用いて、ウラシル（U）含有鋳型の増幅を 25°C、2 分間の消化後に評価しました。

結果：BioReady 熱感受性ウラシル-DNA グリコシラーゼ（UDG）は、ウラシル（U）を含む PCR 産物を効果的に分解することが示されました。U 含有 PCR 産物が存在する場合、UDG を含まないワンステップ RT-qPCR では平均増幅 Ct が 29.66 でしたが、熱感受性 UDG を添加したワンステップ RT-qPCR では全く増幅が見られませんでした。

保存条件

1. キットは冷蔵輸送が必要です。

2. キットの保存：-20°C の冷蔵庫で遮光保存し、繰り返しの凍結融解は 7 回以内としてください。

3. 有効期間：12 か月。有効期間内にご使用ください。