詳細
製品説明
本製品は、RSウイルス、アデノウイルス、パラインフルエンザウイルスの高度に保存された領域を選択し、特異的プライマーと蛍光プローブを設計します。プローブの5'末端は蛍光レポーターで標識され、3'末端は蛍光クエンチャーで標識されています。PCR増幅中、プローブが完全な配列を維持している場合、蛍光レポーターの蛍光は蛍光クエンチャーに吸収され、蛍光は発生しません。
プローブが鋳型に結合すると、DNAポリメラーゼの5'→3'エキソヌクレアーゼ活性によってプローブが切断され、蛍光レポーターが蛍光クエンチャーから分離し、蛍光がクエンチャーに吸収されなくなり、蛍光シグナルが発生します。蛍光PCR装置は検出された蛍光シグナルに基づいて蛍光曲線を自動的に描画し、検出結果を判定します。サンプリング、抽出、PCR増幅の全プロセスをコントロールするために、検出プロセス中に非競合的内部コントロールとしてヒト遺伝子が使用されます。
製品の特長
マルチプレックス検出:
RSウイルス(RSV)、アデノウイルス(ADV)、パラインフルエンザウイルス(PIV)の3種同時検査。
短い所要時間:
最短35分で結果が得られます。
内部コントロール付属:
抽出および検出プロセス全体を監視する内部コントロールを組み込んでおり、結果の信頼性と品質を保証します。
使いやすさ:
完全密閉型の増幅と検出により、1ステップでqPCRが完了し、エアロゾル汚染を防止します。
適用分野
本キット(蛍光PCR法)は、疑い症例から採取した口腔咽頭スワブ検体中のRSウイルス(RSV)、アデノウイルス(ADV)、パラインフルエンザウイルス(PIV)核酸の定性検出に使用します。
保存条件
1. 未開封のキットは、-20℃±5℃、遮光で保存してください。
2. すべてのコンポーネントを上記の方法で保管した場合、キットの有効期限は最大12か月です。記載の有効期限を過ぎたものは使用しないでください。
3. キットは、有効期間に影響を与えることなく、8℃以下で7日間輸送できます。
4. 使用準備が整うまで開封しないでください。開封後は2~8℃で7日間保存可能です。
5. 繰り返しの凍結融解は避けてください(5回以内)。
よくあるご質問
A1: (1) プライマー 合成プライマーが不適切な保存条件により分解していないか確認してください。プライマー設計が適切かどうか、BLASTを使用してプライマーの特異性を確認するか、プライマーを再設計してください。 (2) テンプレート 長期保存や繰り返しの凍結融解により、テンプレートの切断、開環、または分解が生じる可能性があります。テンプレートには新たに調製したDNA二本鎖を使用してください。テンプレートのGC含量が高すぎる場合、二本鎖DNAが開裂しない原因となります。この場合、PCRエンハンサー(品番P021)を添加することで効果的に巻き戻し温度を下げることができます。テンプレートがcDNAの場合、逆転写に使用したRNAの純度と完全性を確認する必要があります。 (3) 酵素 反応に使用する酵素が不適切な保存や輸送により失活している可能性があります。新しい酵素に交換するか、別の供給元の酵素で再実験することを推奨します。 (4) 増幅システム 反応系の調製が不正確であるため、実験を繰り返すことをお勧めします。 (5) 反応プログラム 変性温度が正確かどうか、PCR装置の表示温度と実際の温度が一致しているか確認してください。温度が高すぎると酵素が最初の数サイクルで急速に失活し、低すぎるとテンプレートの変性が不完全になります。アニーリング温度が適切でない場合は、アニーリング温度の勾配を設定し、適切なアニーリング温度を検討してください。プライマーのTm値に基づいてアニーリング温度を設定してください。例えば、プライマーのTm値が72℃以上の場合は、アニーリングステップを省略し、直接伸長ステップ(2ステップPCR)を実施できます。
仕様
| サンプルタイプ | 咽頭スワブ |
|---|---|
| 対象病原体 | アデノウイルス(FAM) RSウイルス(HEX) パラインフルエンザウイルス(ROX) |
| 精度 | 日内、日間、バッチ内、バッチ間の変動係数(CV)はいずれも5%未満でした。 |
| 検出時間 | 35分 |
| 感度 | 500コピー/mL |
| 正確度 | RSV、ADV、PIVを同時に検出可能 |
| 対応機器 | Bioer社の蛍光定量検出システム、LineGene 9600 Plus(FQD-96A)およびQuantGene 9600(FQD-96C)、Applied Biosystems 7500リアルタイムPCRシステム。 |
| 推奨抽出キット | BSC86 MagaBio Plus Virus DNA/RNA Purification Kit III BSC71 MagaBio Plus Virus DNA/RNA Purification Kit II |
| 認証 | CE-IVD |
注文情報
| Cat# | 製品名 | 包装サイズ |
|---|---|---|
| BSJ45M1 | RSウイルス/アデノウイルス/パラインフルエンザウイルス核酸検出キット(蛍光PCR法) | 48T |
| BSJ45L1 | RSウイルス/アデノウイルス/パラインフルエンザウイルス核酸検出キット(蛍光PCR法) | 96T |

